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2020/3/24 8:45:30
来源:人源
组织:肝脏
细胞形态:上皮样细胞
培养属性:贴壁
癌症类型:肝癌
应用:这种细胞适合作为转染宿主

细胞产物:甲胎蛋白、白蛋白、α2巨球蛋白、α1抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α1 抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、血浆铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体(C4)、C3活化因子、纤维蛋白原、α1酸性糖蛋白、胎球蛋白A、β脂蛋白、视黄醇结合蛋白

其他:
细胞有表达3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。
细胞在氧化应激反应中apoA-I mRNA表达降低,过氧化氢酶mRNA表达升高。

没有证据表明该细胞系中存在乙型肝炎病毒基因组。

完全生长培养基:该细胞系的基本培养基是Eagle's Minimum Essential medium。为了制作完整的生长培养基,在基础培养基中加入胎牛血清,最终浓度为10%。

传代培养:

75 cm2的细胞培养瓶。推荐使用康宁? T-75细胞培养瓶(目录号#430641)。按比例增加或减少其他大小的培养容器所需的消化培养基的量。

移除并丢弃培养基。

用0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液短暂冲洗细胞层,清除所有含有胰蛋白酶抑制剂的血清。

向培养瓶中加入2.0-3.0 mL的胰蛋白酶-EDTA溶液,并在倒置显微镜下观察细胞,直至细胞层分散(通常需要5至15min)。

注意:为避免结块,在等待细胞分离时,请勿通过敲击或摇动烧瓶来搅动细胞。可将难以分离的细胞置于37°C促进分散。

加入6.0-8.0 mL完全生长培养基,并轻轻吸取细胞。

将细胞悬液等分,分别添加到新的培养皿中。

37°C孵育。

传代培养比例:建议将继代培养比例设为1:4至1:6

中度更新:每周两次

冷冻保存:
    
冷冻培养基:完全生长培养基,添加5%(v / v)DMSO
储存温度:气相液氮

培养条件:
    
温度: 37°C
大气:空气,95%;二氧化碳(CO 2),5%