本抗体洗脱液是一种高效试剂，专用于去除 Western blot 印迹膜（PVDF 膜或硝酸纤维素膜）上已结合的一抗和二抗，支持在同一张膜上进行多轮抗原检测。

该产品以甘氨酸缓冲体系为基础，配合强离液剂盐酸胍，能够高效破坏抗原-抗体间的特异性结合。同时，配方中添加的氯化钾（KCl）可维持溶液离子强度，EDTA 则通过螯合二价金属离子，有效降低金属介导的非特异性结合。上述成分的均衡配伍，在确保抗体高效洗脱的同时，最大程度保护膜上固定的靶蛋白结构完整性。

产品特点：

• 高效去除已结合的一抗及二抗
• 兼容 PVDF 膜、尼龙膜与硝酸纤维素膜
• 有效保护膜上蛋白，支持多次孵育与检测
• 适用于 HRP 化学发光及荧光检测体系
• 操作简便，结果重复性良好

适用范围

• Western blot 抗体剥离与重孵育

• 适用于基于 HRP（辣根过氧化物酶）化学发光检测体系及荧光检测体系。

• 多靶标蛋白分析：支持在同一张膜上依次检测多个目标蛋白，提升样品利用率与数据一致性。

操作流程

1. 准备工作

       完成目标蛋白的检测（如 ECL 化学发光或荧光成像）后，使用 TBS-T 缓冲液 漂洗膜一次，时间为 5 分钟。

2. 抗体剥离

• 将膜完全浸没于足量的 抗体剥离缓冲液 中。

• 室温条件下，温和振荡孵育 15 分钟，随后弃去剥离缓冲液。

3. 洗涤

• 使用 TBS-T 缓冲液 洗涤膜 3 次，每次 5 分钟。

• 验证剥离效率：完成洗涤后，可加入 ECL 化学发光底物进行曝光检测。若仍有残余化学发光信号（表明一抗或二抗未完全剥离），应 增加 TBS-T 洗涤循环次数，直至背景信号降至可接受水平。

4. 重新封闭与重孵育

• 采用 5% 脱脂牛奶 或 BSA 溶液 室温封闭膜 30 分钟。

• 封闭后，按标准抗体孵育流程进行后续操作。

注意事项

• 实验条件（如剥离缓冲液孵育时间、温度）需根据目标抗体的亲和力进行优化。

• 对于低丰度或稳定性较差的靶标蛋白，建议使用更温和的剥离条件（如减少孵育时间或选用低变性剂浓度的缓冲液），以最大限度保留膜上的蛋白抗原性。

• 多次剥离循环（≥3 次）可能导致靶标蛋白信号强度逐渐衰减，建议合理安排检测顺序，将丰度较低的靶标优先检测。

• 若剥离缓冲液含有盐酸胍等强变性剂，操作时应佩戴适当的防护装备（手套、护目镜等），并在通风良好的环境中进行